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先按上述配方配制液体培养基,临高压灭菌前加入琼脂糖 15g /L,同法高压蒸汽灭菌 20min。从高压灭菌器取出培养基时应轻轻旋动以使熔解的琼脂糖能均匀分布于整个培养基溶液中,应使培养基降温至50℃时,加入抗生素等不耐热的物质。为避免产生
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固体培养基的配置中,琼脂的比例在15%~20%均可。琼脂粉一般加15g,以下为LB固体培养基的配置方法LB固体培养基,倒制时培养基温度不宜过高,否则冷却后平板会产生大量冷凝水。LB(Luria-Bertani)固体培养基在
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实验步骤1. LB 培养基Tryptone10 gYeast Extract5 gNaCl10 g加水至 1000 mL(pH 7.2,固体培养基加 1.8% 琼脂粉)。2. LB 抗性筛选培养基待灭菌后的 LB 固体培养基温度降至 50
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区别一:琼脂 培养基就是加了琼脂粉凝结成固体的LB培养基。 固体的培养基用于细菌 涂板, 抗性筛选挑选单克隆 之用 液体的用于单克隆菌种扩大培养, 提取目的基因或者蛋白之用 区别之二:就是LB培养基是液体的,而
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实验步骤1. LB 培养基Tryptone10 gYeast Extract5 gNaCl10 g加水至 1000 mL(pH 7.2,固体培养基加 1.8% 琼脂粉)。2. LB 抗性筛选培养基待灭菌后的 LB 固体培养基温度降至 50
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1、制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液。2、胶板
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含Amp的LB固体培养基:每100mlLB培养液在临高压灭菌前加入1.5g琼脂,以103.4KPa高压灭菌20min,溶液尚未完全冷却时,即应取出培养基,并轻轻摇动以使琼脂均匀分布于整个培养基中。必须小心,此时培养基溶液可能过热,旋动液体
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根据培养基名称来看,平板计数琼脂培养基即PCA,是在08版GB中用于菌落总数测定的,配方:胰蛋白胨0.5%,酵母浸粉0.25%,葡萄糖0.1%,琼脂1.5%,蒸馏水配制;pH 6.8~7.2。营养琼脂培养基即NA,配方:蛋白胨1%,牛肉膏
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称量、溶胶、倒胶、拔梳。配置步骤如下:1、称量,小胶板0.8%的胶需要琼脂粉0.104gTBE13mL。2、熔胶,将所称量的琼脂粉与TBE在锥形瓶中混合,在微波炉内反复加热2到3次至琼脂粉溶解并无气泡。3、倒胶,干净的胶槽内摆好梳子,往胶内滴加1uL左右核酸染料,混匀,待冷却至不烫手,轻轻倒入胶板内。4、拔梳待大约2分钟即可。
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(1)DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时,普通琼脂糖凝胶就很难将它